基本信息

应用

线粒体自噬研究：可精确定位线粒体，准确示踪线粒体自噬过程；为线粒体代谢过程提供新的研究方法，也为筛选线粒体自噬抑制剂或促进剂提供有效的工具。

优势和特点：

无需与其它探针分子组合使用，进入活细胞后选择性富集于线粒体；当线粒体发生自噬形成自噬溶酶体后其微环境pH下降，使HQO质子化；质子化后HQO的荧光激发和发射波长均发生红移（斯托克斯位移大于100 nm）。

由于微环境pH值的不同，使得HQO在线粒体和自噬溶酶体中呈现不同颜色荧光（图2），因而可以很好地区分正常线粒体和包被损伤线粒体的自噬溶酶体^[1]（见图1）。

图1 HQO示踪活细胞线粒体自噬过程原理图^[1]。

图2 HQO具有两个激发与相应发射波长，一个示踪线粒体，一个示踪自噬溶酶体，通过两个波长的变化来阐述自噬流进程^[1]。

1. Ying Liu, Jin Zhou, Linlin Wang, Xiaoxiao Hu, Xiangjun Liu, Meirong Liu, Zehui Cao, Dihua Shangguan and Weihong Tan. J. Am. Chem. Soc., 2016, 138 (38), pp 12368–12374.

其他说明

使用说明

• 细胞的培养：将细胞种植于共聚焦培养皿中，根据不同实验需要种植相应细胞密度及培养相应时间。
• 诱导自噬、细胞染色和共聚焦成像：适当条件诱导自噬（如无血清培养基、PBS或者细胞自噬激活剂处理等），HQO（10 μM）加入无血清培养基中，37℃孵育10 min，PBS洗涤1-3次，共聚焦成像。559 nm激发，570-610 nm发射波长为示踪正常线粒体的荧光；635 nm激发，650-730 nm发射波长为示踪自噬溶酶体的荧光。