基本信息
分子式 | C22H27FN4O2 |
分子量 | 398.47 |
熔点 | 234-246 |
沸点 | 572.1 |
闪点 | 299.8 |
密度 | 1.2 |
折光率(n20D) | 1.6100 |
MDL编码 | MFCD09260778 |
存储条件 | Freezer -20℃ |
产品描述
Sunitinib 是一种多靶点 RTK 抑制剂,以VEGFR2(Flk-1)和PDGFRβ为靶点,IC50为80 nM 和 2 nM,对c-Kit也有抑制作用。
靶点(IC50 & Targe)
c-Kit,
FLT3,
PDGFRβ,2nM
VEGFR2,80nM
体外研究
Sunitinib能够有效抑制Kit 和FLT-3。[1] Sunitinib是VEGFR2 (Flk1) 和 PDGFRβ有效的ATP竞争性抑制剂,Ki分别为9 nM 和8 nM,作用于VEGFR2和 PDGFR比作用于FGFR-1,EGFR,Cdk2,Met,IGFR-1,Abl,和src选择性高10倍多。在血清饥饿的表达VEGFR2 或PDGFRβ的NIH-3T3细胞中,Sunitinib抑制VEGF依赖性VEGFR2磷酸化和PDGF依赖性PDGFRβ磷酸化,IC50分别为10 nM和10 nM。对于过表达PDGFRβ或PDGFRα的NIH-3T3细胞,Sunitinib抑制VEGF对其诱导的增殖,IC50 分别为39 nM和69 nM。[2] Sunitinib抑制野生型FLT3,FLT3-ITD,和FLT3-Asp835磷酸化,IC50分别为250 nM,50 nM,和30 nM。Sunitinib抑制MV4;11 和OC1-AML5细胞的增殖,IC50分别为8 nM和14 nM,并以剂量依赖的方式诱导细胞凋亡。[3]
体内研究
与实质性,选择性抑制VEGFR2 或PDGFR在体内磷酸化与信号传导一致,Sunitinib (20-80 mg/kg/day)对各种肿瘤异种移植模型,包括HT-29,A431,Colo205,H-460,SF763T,C6,A375,或MDA-MB-435表现出广泛有效的剂量依赖性抗肿瘤活性。Sunitinib以80 mg/kg/day的剂量给药21天,导致8只小鼠中6只完全的肿瘤消退,并且在治疗结束后,110天的观察期内肿瘤不会再生。第二轮使用Sunitinib治疗依然能够有效抗肿瘤,但是不能完全恢复到第一轮治疗的情况。Sunitinib治疗导致肿瘤MVD显著下降,在SF763T神经胶质瘤中减少~40%。SU11248治疗导致表达荧光素酶的PC-3M异种移植物额外的肿瘤生长被完全抑制,尽管肿瘤大小没有减少。[2] 在FLT3-ITD 骨髓移植模型中,Sunitinib治疗(20 mg/kg/day)显著抑制皮下MV4;11 (FLT3-ITD)异种移植物的生长,并延长生存。[3]
激酶实验
生化酪氨酸激酶试验:
Sunitinib作用于VEGFR2 (Flk-1)和PDGFRβ的IC50值使用包含PKT完整胞浆区的谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白测定。生物化学的酪氨酸激酶试验,用来测定VEGFR2 (Flk-1)和PDGFRβ反式磷酸化活性,在多肽底物poly-Glu,Tyr (4:1)预涂层(在PBS中20 μg/well;4 °C下培养过夜)的96微孔板中进行。过量蛋白结合位点通过加入1-5% (w/v) BSA的PBS溶液阻断。纯化的GST融合蛋白在感染杆状病毒的昆虫细胞中产生。将GST-VEGFR2 和GST-PDGFRβ加入微孔板的2倍浓度激酶稀释缓冲液(由100 mM HEPES,50 mM NaCl,40 μM NaVO4,和0.02% (w/v) BSA组成)中。对GST-VEGFR2或GST-PDGFRβ的最终酶浓度为50 ng/mL。随后将25μL稀释的Sunitinib加入每个反应孔中以产生一系列适用于每个酶的抑制剂浓度。激酶反应通过加入不同浓度的ATP MnCl2溶液起始,使ATP浓度跨越酶的Km值,终MnCl2浓度为10 mM。板在室温下培养5-15分钟,然后加入EDTA停止反应。将板用TBST洗涤3次。在TBST(包含0.5% (w/v) BSA,0.025% (w/v)脱脂奶粉,和100 μM NaVO4)中以1:10,000稀释的兔子多克隆抗磷酸酪氨酸抗血清加入孔中,并在37℃下培养1小时。然后将板用TBST洗涤3次,接着加入山羊抗兔抗血清结合的辣根过氧化物酶(在TBST中以1:10,000 稀释)。板在37℃下培养1小时,然后用TBST清洗3次。加入2,2′-azino-di-[3-ethylbenzthiazoline sulfonate]作为底物后,测定每孔中的磷酸酪氨酸酶数量。
细胞实验
Cell lines: RS4;11,MV4;11,和 OC1-AML5
Concentrations: 溶解于DMSO,终浓度为~10 μM
Incubation Time: 24和48小时
Method: 加入Sunitinib和FL (50 ng/mL;仅FLT3-WT细胞)之前,细胞在包含0.1% FBS的培养基中饥饿过夜。培养48小时后,使用Alamar Blue法或台盼蓝细胞活性法测定增殖。加入Sunitinib 24小时后,通过蛋白免疫印迹法检测多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的裂解或caspase-3水平,以测量细胞凋亡。
(Only for Reference)
动物实验
Animal Models: 皮下植入HT-29,A431,Colo205,H-460,SF763T,C6,A375,或MDA-MB-435的雌性nu/nu小鼠,和负荷表达荧光素酶的PC-3M肿瘤的雄性nu/nu小鼠。
Formulation: 以羧甲基纤维素悬浮液或柠檬酸盐缓冲溶液(pH 3.5)形成
Dosages: ~80 mg/kg
Administration: 口服,每天一次
(Only for Reference)
参考文献
[1] Sun L, et al. J Med Chem, 2003, 46(7), 1116-1119.
[2] Mendel DB, et al. Clin Cancer Res, 2003, 9(1), 327-337.
[3] O'Farrell AM, et al. Blood, 2003, 101(9), 3597-3605.
[4] Abrams TJ, et al. Mol Cancer Ther, 2003, 2(10), 1011-1021.
[5] Yee KW, et al. Blood, 2004, 104(13), 4202-4209.
[6] Ikezoe T, et al. Mol Cancer Ther, 2006, 5(10), 2522-2530.
安全信息
防范说明 | P262 |
RTECS | UX9355900 |
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