生物活性
RAF709 是一种新型有效的 Raf 激酶抑制剂,抑制 c-Raf 和 b-Raf,IC50 分别为 0.4 和 1.5 nM。RAF709具有高选择性,在所检测的456种激酶中,1 μM RAF709的靶向效应大于99%(BRAF, BRAFV600E和CRAF)。RAF709对RAF寡聚物和二聚体具有相等的活性作用。
在体外生化检测中,RAF709对BRAF, BRAFV600E和CRAF具有有效的抑制活性,IC50值在0.3-1.5 nM间,在HCT116细胞中,诱导和稳定B/CRAF异源二聚化,但抑制了MEK和ERK磷酸化,抑制RAF二聚体活性。RAF709选择性地抑制了癌基因信号和携有BRAF, NRAS或KRAS突变的肿瘤细胞的增殖。
体内研究:RAF709在携有KRAS突变的移植瘤模型中耐受性良好。RAF709具有一定的血浆稳定性(在大鼠、小鼠、狗和人类血浆中分别剩余85%、82%、95%和101%),在各个不同的物种中,血浆蛋白结合率为98%。在药代动力学实验中,RAF709在小鼠和狗中具有中等清除率(分别为35 mL/min/kg和14 mL/min/kg),在大鼠中具有高清除率(50 mL/min/kg)。在Calu-6移植瘤小鼠模型中,RAF709的处理将发挥其剂量依赖性的抗肿瘤活性。
化学数据
分子量 | 542.55 |
分子式 | C28H29F3N4O4 |
CAS号 | 1628838-42-5 |
纯度 | >98% |
溶解性(25°C) | DMSO 100 mg/mL Ethanol 100 mg/mL |
储存和运输条件 | 固体粉末: -20°C 冷藏长期储存 常温运输及临时存放 |
实验操作 来自于公开的文献,仅供相同实验参考(如实验材料、目的不同,请参考其他文献)
细胞实验 |
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细胞系 | HCT116 cells |
方法 | HCT116 cells are treated with DMSO or RAF709 at indicated concentrations for 1 hour; 1 mmol/L dabrafenib treatment is included for comparison. BRAF/CRAF dimerization is assessed by immunoprecipitating BRAF or CRAF, followed by Western blot analysis of BRAF and CRAF. Levels of pMEK and pERK in whole-cell lysates (WCL) are determined by Western blot analysis. GAPDH level is included as a loading control. |
浓度 | 0.1, 1, 10 μM |
处理时间 | 1 hour |
动物实验 |
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动物模型 | Calu-6 model (tumor bearing mice) |
配制 | 20% Captisol |
剂量 | 10, 30, or 200 mg/kg |
给药处理 | oral administration |
不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表(数据来源于FDA指南)
| 小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 |
重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
Km系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
动物 A的Km系数 |
例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
储备液配制
以下数据基于产品分子量,对于特殊产品,请参照COA中的储备液配制条件和说明进行操作。
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
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1 mM | 1.8431 mL | 9.2157 mL | 18.4315 mL |
5 mM | 0.3686 mL | 1.8431 mL | 3.6863 mL |
10 mM | 0.1843 mL | 0.9216 mL | 1.8431 mL |