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BCECF-AM
本产品不向个人销售,仅用作科学研究,不用于任何人体实验及非科研性质的动物实验。
BCECF-AM图片
CAS NO:117464-70-7
包装:1mg, 5mg
包装与价格:
包装价格(元)
1mg电议
5mg电议

产品介绍

生物活性

BCECF-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料,是最常用的检测细胞内pH的荧光探针。BCECF-AM本身没有荧光,进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成BCECF,从而被滞留在细胞内。BCECF在适当的pH值情况下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和发射波长因pH的不同而有所不同,最大激发波长在503nm左右,最大发射波长在520nm左右,实际检测时推荐使用的激发波长为488nm,发射波长为535nm。

BCECF-AM不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究,也有报道用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的细胞内pH水平检测。在有细胞内pH变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中BCECF-AM被广泛应用。

用于细胞内pH检测时,常用的BCECF-AM的浓度为1~10μM。
 

操作说明(for Human Neutrophil)*

(1) 试剂

1 mM的BCECF-AM/DMSO

HEPES 缓冲液(20 mM HEPES, 153 mM NaCl, 5 mM KCl, 5 mM glucose, pH 7.4)

(2) 操作

① 用HEPES制备细胞悬液,细胞浓度为4×107个/mL。

② 将1mM的BCECF-AM/DMSO溶液加入细胞悬液中 (细胞悬液的1/300体积),BCECF-AM终浓度为3μM。

③ 在37 oC培养30分钟。

④ 用HEPES缓冲液清洗细胞3次,制成3×106个/mL的细胞悬液。

⑤ 使用荧光显微镜或带有图像分析系统的激光共聚显微镜检测细胞的荧光强度。

*标记的条件因细胞种类而异,在每次实验前,请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。

 


化学数据

分子量808.69
分子式C39H36O19
CAS号117464-70-7
纯度>99%
溶解性(25°C)DMSO
储存和运输条件-20°C, dry, protect from light, sealed
常温运输及临时存放

不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表(数据来源于FDA指南)

小鼠大鼠豚鼠仓鼠
重量 (kg)0.020.151.80.40.0810
体表面积 (m2)0.0070.0250.150.050.020.5
Km系数36128520
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × 动物 B的Km系数
动物 A的Km系数

例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。


储备液配制

以下数据基于产品分子量,对于特殊产品,请参照COA中的储备液配制条件和说明进行操作。

Concentration / Solvent Volume / Mass1 mg5 mg10 mg
1 mM1.2366 mL6.1828 mL12.3657 mL
5 mM0.2473 mL1.2366 mL2.4731 mL
10 mM0.1237 mL0.6183 mL1.2366 mL