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Taq DNA Polymerase
本产品不向个人销售,仅用作科学研究,不用于任何人体实验及非科研性质的动物实验。
包装与价格:
包装价格(元)
1000U电议
5000U电议

产品介绍

描述

我们的产品Taq DNA聚合酶能够在适当缓冲体系中,基因特异性引物和dNTPs存在的情况下根据已解链的模板合成DNA。 它是从大肠杆菌中提取的重组产物,表达了thermu aquaticus DNA聚合酶基因。
Taq DNA聚合酶具有5'→3'DNA聚合酶和微弱的5'→3'核酸外切酶的能力,但没有3'→5'外切酶的能力,这意味着会在3'末端出现dA突出。 利用该特性,它可用于TA克隆。 在PCR反应中,Taq DNA聚合酶的延伸率约为1-2 kb / min,这取决于模板基因的复杂程度。对于大部分模板,您可以使用1 min/kb. 如果需要对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,可以使用我们的产品SYBR Safe DNA Gel Stain(Cat:A8743)加入胶中。

组份和存储

Components1000 U5000 U
Taq DNA Polymerase200 μl1 ml
10X PCR Buffer(Mg2+plus)2 × 1 ml10 × 1 ml
将所有组分储存在-20°C。

特性

可用于一般PCR,添加dA(腺嘌呤)突出或其他实验的理想产品

更低的单实验成本

常见问题解答

常见问题可能原因解决方案
PCR产物没有或非常少
引物设计不佳选择适当的引物设计软件进行引物设计
待扩增片段GC含量偏高或片段长推荐使用其它更适合的DNA聚合酶
退火温度不佳;延伸时间太短;循环数太少优化PCR实验条件
模板浓度过低;实验样品 DNA损伤或降解适当加大模板量;重新制备模板
模板质量太差用适当的DNA纯化方法例如柱纯化等纯化模板DNA
引物浓度过低;Mg2+浓度未优化适当调整引物浓度及Mg2+浓度
扩增特异性差,非特异性扩增
引物设计不完善引物与靶序列有非特异性互补或自身聚合成二聚体,可降低引物浓度,必要时重新设计引物
模板质量太差

模板不纯,被污染,需重新制备模板;

模板降解或过量,通过电泳检查模板完整性及浓度,必要时重新纯化模板

PCR 循环条件未优化如果出现比目的条带小的杂带,可通过提高退火温度,降低循环数调整;如果出现比目的条带大的杂带,可缩短延伸时间、降低循环数
空白对照出现扩增产物
引物设计不合理扩增序列与非目的扩增序列有同源性,PCR也可以扩增出非靶序列的序列,重新设计引物
携带污染若扩增产物条带大小与目的条带一致,说明有污染;更换新的Mix、水或引物重复实验;反应体系在超净工作台内配制,减少气溶胶污染
扩增的条带亮度不够
引物降解检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解,必要可更换引物
模板质量首先确认模板的质量,长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解,应使用新鲜制备的DNA双链作为模板;如果模板没有了,可用首次扩增产物按倍比稀释后作为模板进行二次扩增
酶浓度可适当提高酶的使用量
PCR 循环条件未优化可尝试使用Touch Down程序;延长延伸时间,提高循环数