CAS NO: | 1233339-22-4 |
包装 | 价格(元) |
10mM (in 1mL DMSO) | 电议 |
5mg | 电议 |
10mg | 电议 |
50mg | 电议 |
Physical Appearance | A solid |
Storage | Store at -20°C |
M.Wt | 412.51 |
Cas No. | 1233339-22-4 |
Formula | C21H24N4O3S |
Synonyms | AZ-20;AZ 20 |
Solubility | ≥20.65 mg/mL in DMSO; insoluble in H2O; ≥4.19 mg/mL in EtOH with gentle warming and ultrasonic |
Chemical Name | (R)-4-(2-(1H-indol-4-yl)-6-(1-(methylsulfonyl)cyclopropyl)pyrimidin-4-yl)-3-methylmorpholine |
Canonical SMILES | O=S(C1(C2=CC(N3CCOC[C@H]3C)=NC(C4=CC=CC5=C4C=CN5)=N2)CC1)(C)=O |
运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
一般建议 | 为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存,请尽快用完。 |
AZ20是一种有效的和选择性的ATR抑制剂。在HeLa细胞核提取物中,AZ20抑制ATR免疫沉淀,IC50值为5 nM。在HT29结直肠腺癌细胞中,AZ20抑制ATR介导的Chk1的磷酸化,IC50值为50 nM。
ATR是一个有吸引力的新型抗癌药物靶标,其抑制剂可作为化疗或放疗增敏剂,或作为单药用于治疗嗜DNA修复途径的肿瘤。
AZ20是第一个报道的具有体内肿瘤生长抑制活性的ATR蛋白激酶抑制剂,因此是一个有用的探针分子,可帮助进一步研究ATR肿瘤生物学。AZ20有效抑制LoVo结直肠腺癌细胞的生长。在mTOR(pAKT)细胞实验中,AZ20微弱抑制重组mTOR酶的活性。AZ20对PI3K的所有亚型以及ATM和DNA-PK均有很好的选择性。在一系列激酶测试中,AZ20具有非常高的一般激酶的选择性。
在LoVo结直肠癌异种移植雌性裸鼠中,AZ20以25 mg/kg的剂量一天2次,或50 mg/kg的剂量一天一次口服给药,连续给药13天,AZ20具有很好的单药抗肿瘤功效。
参考文献:
[1]. Foote KM, Blades K, Cronin A et al. Discovery of 4-{4-[(3R)-3-Methylmorpholin-4-yl]-6- [1-(methylsulfonyl)cyclopropyl]pyrimidin-2-yl}-1H-indole (AZ20): a potent and selective inhibitor of ATR protein kinase with monotherapy in vivo antitumor activity. J Med Chem. 2013 Mar 14;56(5):2125-38.
激酶实验 [1]: | |
ATR激酶检测 | 在由25 mM HEPES (pH 7.4),2 mM MgCl2,250 mM NaCl,0.5 mM EDTA,0.1 mM Na3VO4,10% v/v甘油和0.01% v/v吐温20组成的缓冲液中,使用抗ATR 400 ~ 480的兔多克隆抗血清进行免疫沉淀,从HeLa细胞核中提取ATR,将其用于后续的体外酶测定。将核提取物与蛋白A-琼脂糖珠一起孵育1小时,然后通过离心回收珠子,最终分离出ATR-抗体复合物。在96孔板中,将10 μL含ATR的琼脂糖磁珠与1 μg谷胱甘肽S-转移酶置于ATR测定缓冲液(50 mM HEPES (pH 7.4),150 mM NaCl,6 mM MgCl2,4 mM MnCl2,0.1 mM Na3VO4,0.1 mM DTT,以及10% (v/v) 甘油)中,于37°C下,在有或无抑制剂的环境下,将其孵育。轻轻摇晃10分钟后,加入ATP至最终浓度为3 μM,反应在37°C下持续1小时。加入100 μL PBS终止上述反应,再将反应混合物转移至包被了白色不透明谷胱甘肽的96孔板中,将其置于4℃中,孵育过夜。使用PBS/0.05% (v/v) 吐温20洗涤96孔板,将其吸干,使用磷酸丝氨酸15 p53抗体通过标准的ELISA技术进行分析。当检测磷酸化的谷胱甘肽S-转移酶- p53N66底物时,以结合了辣根过氧化物的山羊抗小鼠作为二抗。增强的化学发光溶液产生相应的信号,通过TopCount读板器可以检测化学发光。计算酶活性,结果以%表示,然后确定化合物的IC50值。 |
细胞实验 [1]: | |
细胞系 | BT-474细胞和HT29结直肠腺癌细胞 |
制备方法 | 在DMSO中的溶解度大于10 mM。若配制更高浓度的溶液,一般步骤如下:请将试管置于37℃加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20℃可放置数月。 |
反应条件 | 60分钟 |
实验结果 | 在BT-474细胞中,AZ20抑制pAKT T308。在HT29细胞中,AZ20抑制pATM Ser-1981和pDNA-PK Ser-2056。在LoVo结直肠腺癌细胞中,AZ20抑制细胞生长,其GI50为0.20 μM.。 |
动物实验 [1]: | |
动物模型 | 携带LoVo肿瘤的雌性裸鼠 |
给药剂量 | 5 mg/kg,每日2次,以及50 mg/kg,每日1次;口服 |
实验结果 | 当剂量为10 μM时,AZ20抑制细胞色素3A4介导的Midazolam代谢。在低剂量的老鼠PK实验中, AZ20具有相当的生物利用度。 |
其它注意事项 | 请于室内测试所有化合物的溶解度。虽然化合物的实际溶解度可能与其理论值略有不同,但仍处于实验系统误差的允许范围内。 |
References: [1]. Foote KM, Blades K, Cronin A et al. Discovery of 4-{4-[(3R)-3-Methylmorpholin-4-yl]-6- [1-(methylsulfonyl)cyclopropyl]pyrimidin-2-yl}-1H-indole (AZ20): a potent and selective inhibitor of ATR protein kinase with monotherapy in vivo antitumor activity. J Med Chem. 2013 Mar 14;56(5):2125-38. |
描述 | AZ20是一种有效的和选择性的ATR激酶抑制剂,IC50值为5 nM。 | |||||
靶点 | ATR kinase | |||||
IC50 | 5 nM |