PF-03084014

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PF-03084014

本产品不向个人销售，仅用作科学研究，不用于任何人体实验及非科研性质的动物实验。

CAS NO:

865773-15-5

包装与价格：

包装	价格(元)
10mM (in 1mL DMSO)	电议
5mg	电议
10mg	电议
25mg	电议
50mg	电议

产品介绍

化学性质

Physical Appearance	A solid
Storage	Store at -20°C
M.Wt	489.64
Cas No.	865773-15-5
Formula	C₂₇H₄₁F₂N₅O
Synonyms	PF 03084014;PF03084014
Solubility	≥19.8 mg/mL in DMSO
Chemical Name	(2S)-2-[[(2S)-6,8-difluoro-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-yl]amino]-N-[1-[1-(2,2-dimethylpropylamino)-2-methylpropan-2-yl]imidazol-4-yl]pentanamide
Canonical SMILES	CCCC(C(=O)NC1=CN(C=N1)C(C)(C)CNCC(C)(C)C)NC2CCC3=CC(=CC(=C3C2)F)F
运输条件	蓝冰运输或根据您的需求运输。
一般建议	为了使其更好的溶解，请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存，请尽快用完。

资料参考

PF-03084014是可逆的γ-分泌酶选择性抑制剂，其IC50值为6.2 nM[1]。

Notch信号传导途径受Notch配体和相邻细胞膜上Notch受体的相互作用而被激活。随后，γ-分泌酶诱导NICD片段的裂解和释放，调控下游基因的转录。由于Notch信号传导途径参与各种癌症的发展，γ-分泌酶小分子抑制剂正被开发作为抗癌药物，有望用于癌症治疗。PF-03084014是一种GSIs（γ-分泌酶抑制剂），抑制HeLa细胞产生Aβ，其IC50值为6.2 nM。与此同时，PF-03084014对其它受体、蛋白酶、离子通道和激酶无显著抑制作用，这表明其对γ分泌酶的选择性[1，2]。

在取自突变CLL患者的CLL（慢性淋巴细胞白血病）细胞中，给予10 μM的PF-03084014能诱导29.63％的细胞凋亡。浓度为1 μM的PF-03084014可以诱导7.84％的细胞凋亡。在无Notch1突变的细胞中，PF-03084014在1和10 μM的浓度下，分别引起22.04%和4.44%的细胞凋亡。在取自Notch1突变CLL患者的正常T细胞中，PF-03084014没有诱导显著的细胞凋亡。在携带Notch1突变的HPB-ALL细胞中，PF-03084014抑制Notch受体裂解，其IC50值为13.3 nM。PF-03084014也可以下调细胞中的Hes-1和cMyc表达。结果表明，PF-03084014诱导细胞周期阻滞于G0-G1期，从而抑制细胞生长 [1，3]。

在HPB-ALL肿瘤异种移植模型中，口服给予50 mg/kg的PF-03084014，于24小时后，抑制NICD产生（70% ~ 80%）。150 mg/kg的PF-03084014可以产生最大的肿瘤生长抑制作用（92％）。此外，联合使用PF-03084014和GEM能显著抑制肿瘤生长，以及引起PDA（胰腺导管腺癌）异种移植物的肿瘤消退。据报道，联合使用PF-03084014和Dexamethasone可以消除PF-03084014诱导的胃肠道毒性 [1，4]。

参考文献：
1. Wei P, Walls M, Qiu M, et al. Evaluation of selective γ-secretase inhibitor PF-03084014 for its antitumor efficacy and gastrointestinal safety to guide optimal clinical trial design. Molecular cancer therapeutics, 2010, 9(6): 1618-1628.
2. Arcaroli J J, Quackenbush K S, Purkey A, et al. Tumours with elevated levels of the Notch and Wnt pathways exhibit efficacy to PF-03084014, a γ-secretase inhibitor, in a preclinical colorectal explant model. British journal of cancer, 2013, 109(3): 667-675.
3. López-Guerra M, Xargay-Torrent S, Rosich L, et al. The γ-secretase inhibitor PF-03084014 combined with fludarabine antagonizes migration, invasion and angiogenesis in NOTCH1-mutated CLL cells. Leukemia, 2014.
4. Yabuuchi S, Pai S G, Campbell N R, et al. Notch signaling pathway targeted therapy suppresses tumor progression and metastatic spread in pancreatic cancer. Cancer letters, 2013, 335(1): 41-51.

试验操作

激酶实验 [1]:
γ-分泌酶试验	使用定做的寡核苷酸和APP695 cDNA，通过PCR扩增产生所需的DNA片段 [编码APP (APP695) 695-aa同种型的氨基酸596 ~ 695以及C末端的Flag序列 (DYKDDDDK)]。Met作为翻译起始位点，是APP 695的残基596（作用于β-分泌酶裂解位点的P1残基）。将上述DNA片段插入到原核表达载体pET2-21b中。通过Mono-Q柱色谱纯化大肠杆菌 [菌株BL21 (DE3)] 大量表达的重组蛋白，C100Flag。于37℃下，在缓冲液B (50 mM Pipes, pH 7.0/5 mM MgCl2/5 mM CaCl2/150 mM KCl) 中，将C100Flag (1.7 μM) ，CHAPSO、CHAPS（3 - [（3-胆酰胺丙基）二甲氨基] -1-丙磺酸盐）或Triton X-100 (0、0.125、0.25、0.5或1%) 和细胞膜 (0.5 mg/mL) 一起孵育。加入RIPA停止（150 mM NaCl/1.0% NP-40/0.5%脱氧胆酸钠/0.1% SDS/50 mM Tris HCl, pH 8.0），沸腾5分钟，终止上述反应。将样品离心，取上清液，通过ECL测定Aβ肽。γ-分泌酶介导C100Flag处理，产生Aβ40和Aβ42相关产物。上述产物在N末端具有一个Met，因此分别被定义为M-Aβ40和M-Aβ42。同样地，使用CHAPSO萃取HeLa细胞膜（可溶性γ-分泌酶），将上清液 (0.125 mg/mL) 与C100Flag (1.7 μM)置于含0.25% CHAPSO的缓冲液B中孵育，通过ECL测定M-Aβ40和M-Aβ42。
细胞实验 [2]:
细胞系	人T-ALL细胞系HPB-ALL
制备方法	可溶于DMSO。若配制更高浓度的溶液，一般步骤如下：请将试管置于37℃加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20℃可放置数月。
反应条件	~ 1 μM；7天
实验结果	在HPB-ALL细胞中，PF-03084014通过诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡抑制细胞生长。
动物实验 [2]:
动物模型	HPB-ALL细胞异种移植瘤小鼠模型
给药剂量	75和150 mg/kg；口服给药；每日2次，持续14天
实验结果	在HPB-ALL模型中，口服给予PF-03084014，每日2次，持续14天，有效对抗肿瘤。 PF-03084014呈剂量依赖性地抑制肿瘤生长。当剂量为150 mg/kg时，PF-03084014显示出最大的肿瘤生长抑制 (~ 92%)。
其它注意事项	请于室内测试所有化合物的溶解度。虽然化合物的实际溶解度可能与其理论值略有不同，但仍处于实验系统误差的允许范围内。
References: [1]. Li YM, Lai MT, Xu M, Huang Q, DiMuzio-Mower J, Sardana MK, Shi XP, Yin KC, Shafer JA, Gardell SJ. Presenilin 1 is linked with gamma-secretase activity in the detergent solubilized state. Proc Natl Acad Sci U S A. 2000 May 23;97(11):6138-43. [2]. Wei P, Walls M, Qiu M, et al. Evaluation of selective γ-secretase inhibitor PF-03084014 for its antitumor efficacy and gastrointestinal safety to guide optimal clinical trial design. Molecular cancer therapeutics, 2010, 9(6): 1618-1628.