Thiazolyl Blue (MTT) is a cell-permeable and positively charged tetrazolium dye that is used to detect reductive metabolism in cells. Thiazolyl Blue is taken up by cells through the plasma membrane and then reduced to formazan by intracellular NAD (P) H-oxidoreductases. Thiazolyl Blue is frequently used in colorimetric assays to measure cell proliferation, cytotoxicity, andapoptosis^[1].

1. 制备储存液
用 PBS 配制 5 mg/mL 储备液，用 0.22 μm 滤膜过滤除菌，4℃ 避光短时间保存。
2.细胞增值检测 (以96孔板为例)
2.1 接种细胞：用含 10％ 胎牛血清的培养液配成单个细胞悬液，以每孔 1000-10000 个细胞接种到 96 孔板，每孔体积 100 uL。
2.2 培养细胞：37℃，5% CO2，培养 24-72 h。
2.3 每孔加入10 μL MTT 溶液 (5 mg/mL)，孵育 4 小时，终止培养。小心吸去孔内培养上清液，对于悬浮细胞需离心后再吸去孔内上清液。
2.4 每孔加入100 uL DMSO，置摇床上低速振荡 10 分钟，使结晶物充分溶解。
2.5 比色：选择 490 nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。

414.32

Solid

C₁₈H₁₆BrN₅S

298-93-1

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

4°C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

DMSO : 25 mg/mL(60.34 mM;ultrasonic and warming and heat to 60℃)

H₂O : 0.88 mg/mL(2.12 mM;Need ultrasonic and warming)

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80℃, 6 months; -20℃, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80℃ 储存时，请在 6 个月内使用，-20℃ 储存时，请在 1 个月内使用。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照In Vitro方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用； 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

• 1.

  请依序添加每种溶剂： PBS

  Solubility: 6.67 mg/mL (16.10 mM); Clear solution; Need ultrasonic
• 2.

  请依序添加每种溶剂： 10% DMSO    40%PEG300   5%Tween-80   45% saline

  Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (5.02 mM); Clear solution

  此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (5.02 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。

  以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

  将 0.9 g 氯化钠，完全溶解于 100 mL ddH2O 中，得到澄清透明的生理盐水溶液
• 3.

  请依序添加每种溶剂： 10% DMSO    90% (20%SBE-β-CDin saline)

  Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (5.02 mM); Clear solution

  此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (5.02 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。

  以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中，混合均匀。

  将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中，再用生理盐水定容至 10 mL，完全溶解，澄清透明