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辅酶Ⅱ(NADP+/NADPH)含量测试盒(比色法)
辅酶Ⅱ(NADP+/NADPH)含量测试盒(比色法)图片
货号:A115-1-1
参考价格:785元/盒
包装:50T/24样


产品名称
CoenzymeⅡ(NADP /NADPH) content test kit
辅酶Ⅱ含量测试盒(比色法)
产品介绍

测定原理:
       分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP+和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用,使氧化型噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm下检测吸光值,从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原NADP+为NADPH,从而检测NADP+含量。

仪器设备(自备):
       可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成:(50T/24 样)
酸性提取液:50ml×1 瓶,4°C保存;
碱性提取液:50ml×1 瓶,4°C保存;
试剂一:液体15 ml×1 瓶,4°C保存;
试剂二:粉剂×1 支,-20 °C保存,用时加入4ml 蒸馏水,混匀;用不完的试剂4°C保存一周;
试剂三:粉剂×1 支,-20°C保存,用时加入4ml 蒸馏水,混匀;用不完的试剂4°C保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 °C保存,用时加入4ml 蒸馏水,混匀;用不完的试剂4°C保存一周;
试剂五:液体1.8ml×1 支,4 °C保存;
试剂六:液体30ml×1 瓶,4 °C保存;
试剂七:液体50ml×1 瓶,4 °C保存。

操作步骤:
(一)NADP+和NADPH 的提取:
详见试剂盒内说明书关于样本处理的说明。
(二)测定步骤: (在1.5ml 棕色EP管中按下表依次加样,反应过程需要避光):

      试剂名称(μl)      对照管        测定管
         样本5050
        试剂一250250
        试剂二7575
        试剂三7575
        试剂四7575
        试剂五3535
        试剂六500混匀,室温避光静置20min
        试剂六
500

   充分混匀,静置5min后,20000g,25°C离心5min,弃上清,沉淀中加入:

        试剂七10001000

       混匀,波长570nm,光径1cm,双蒸水调零测定对照吸光值A1和测定管吸光
值A2,计算△A=A2-A1。

       注:对照管试剂五加完后必须马上加入试剂六,而测定管加完试剂五之后必须反应20min后再加试剂六。

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